SARS-CoV-2: Desenvolvimento de Pesquisas, Vacinas e Terapias
Além da necessidade do desenvolvimento rápido de ensaios para detectar o SARS-CoV-2 e identificar os indivíduos expostos, as crises de COVID-19 levaram a grandes esforços mundiais para desenvolver tratamentos medicamentosos e vacinas efetivas contra a SARS-CoV-2. Um entendimento mais abrangente da biologia do vírus SARS-CoV-2 também é necessária. Nós apoiamos cientistas que trabalham para desenvolver vacinas e responder a perguntas sobre patologia viral e tratamentos, tais como:
- Como o vírus entra nas células humanas?
- Como o vírus faz as pessoas adoecerem?
- Quais tratamentos podem ser usados para aliviar os sintomas?
- Como é possível desenvolver imunidade ao vírus?
Nós oferecemos suporte colaborativo e um amplo portfólio de reagentes usados nos laboratórios de pesquisa que estão pesquisando os coronavírus e outras doenças virais emergentes.
SARS-CoV-2 Drug Discovery and Vaccine Development
Assays and technologies for SARS-CoV-2 include solutions for monitoring SARS-CoV-2 viral entry, detecting neutralizing antibodies and their ADCC or ADCP activity, and measuring viral protease activity.
Detecção de Interações Vírus: Hospedeiro Proteína: Proteína
Entender como o vírus SARS-CoV-2 entra nas células hospedeiras é potencialmente um primeiro passo para desenvolver um tratamento ou prevenir infecções. A entrada viral depende de interações proteína: proteína entre um receptor na superfície da célula hospedeira e as proteínas virais. Ensaios para interações proteína: proteína são uma ferramenta valiosa para estudar estas interações.
As tecnologias NanoBiT® e NanoBRET™ oferecem a sensibilidade necessária para detectar interações proteína: proteína nas concentrações expressadas in vivo. Ambas são métodos baseados em bioluminescência que são particularmente úteis em estudos virais devido a seu tamanho pequeno e ao sinal intenso da luciferase utilizada. Para mais detalhes, veja as referências e recursos abaixo.
Products for Monitoring Virus:Host Cell Interactions
Protein Interaction Assays
Products for the analysis of viral:host protein interactions include NanoBiT® complementation assay, NanoBRET® BRET-based assays and pull-down assays.
Protein Quantitation Assays
Tag proteins with the 11aa HiBiT tag and detect with reagents containing the high-affinity LgBiT subunit to form a bright luminescent signal.
Luciferase Reporter Assays
Multiple options for detecting NanoLuc®, firefly, or Renilla luciferase to create reporter assays optimized for specific experimental goals. Both lytic or live-cell options as well as single- or dual-reporter detection.
Virus:Host Interaction Resources
Host Immune Response
Uma questão chave levantada por pesquisadores em virologia é a de como o sistema imune de um hospedeiro responde à infecção viral, tanto em relação à imunidade inata quanto à imunidade adaptativa. A resposta imune inata envolve a ativação de inflamassomas e a liberação de citocinas. Por mais que essa liberação de citocinas seja terapêutica, uma "tempestade de citocinas" pode ser um efeito colateral adverso em pacientes, que deve ser administrada com terapêuticos adicionais feitos para bloquear a eficácia de citocinas como a IL-6 e a IL-15.
Além da resposta imune inata, respostas humorais e celulares desempenham papeis chave na resposta do hospedeiro. Essas questões podem ser respondidas com bioensaios repórteres e com ensaios para detectar a atividade de caspase-1 e níveis de citocinas em aplicações de pesquisa celular.
Products for Monitoring Host Immune Response
Caspase-1 Activity
Conversion of procaspase-1 zymogen into active caspase-1 is a key marker of inflammasome formation.
Inflammation Assays
We offer simple add-mix-measure assays for the detection of a variety of cytokines in cell culture samples.
ADCC Activity Bioassay
The ADCC Reporter Bioassay can be used to measure the potency and stability of antibodies that bind and activate Fcγ receptors.
Monitoramento da Função da Célula Hospedeira
Monitorar compostos para atividade antiviral inclui a testagem de efeitos citopáticos induzidos viralmente em células hospedeiras. Um ensaio de viabilidade compatível com análise de alto rendimento, como o CellTiter-Glo®, é útil para testar centenas ou milhares de compostos de uma vez, reduzindo o tempo necessário para analisar o efeito de tratamentos em potencial. Ensaios de viabilidade também são usados em estudos para investigar o mecanismo de ação de vírus.
Somado aos efeitos citopáticos, a infecção viral induz mudanças no metabolismo celular. Em muitas doenças infecciosas, vírus reprogramam o metabolismo da célula hospedeira para possibilitar a replicação viral. Estas mudanças podem ser melhor compreendidas utilizando ensaios que monitoram o consumo de nutrientes e mudanças e co-fatores como NADPH, entre outros.
A caracterização de proteínas por espectrometria de massa é outra abordagem usada para monitorar mudanças induzidas por vírus em células hospedeiras. A análise de mudanças em proteínas celulares ajuda pesquisadores a entender como os vírus interagem com os caminhos celulares.
Using Cell Viability Assays in Screens for SARS-CoV-2 Drug Candidates
Como o Coronavírus entra nas células e como impedi-lo
Leia sobre interações vírus-hospedeiro, e como ensaios de viabilidade celular ajudam nesses estudos.Dr. Colleen Jonsson, Director of the Regional Biocontainment Laboratory and Director of the Institute for the Study of Host-Pathogen Interactions at the University of Tennessee Health Science Center, has been studying highly pathogenic human viruses for more than three decades. She has led several cross-institutional projects using high-throughput screens to discover small molecules that could be used as antiviral drugs. And now, she’s using that experience to find an antiviral therapeutic against SARS-CoV-2. For her high-throughput screens, Dr. Jonsson used the CellTiter-Glo® Cell Viability Assay to determine whether the small molecules inhibit virus-induced cell death. Read more here.
“The CellTiter-Glo® Assay provides a very robust, easy-to-use reagent for high-throughput screening of small molecules for antiviral activity.”
Products for Monitoring Host Cell Response
Host Cell Viability
CellTiter-Glo® products provide a simple "add-mix-measure" protocol for determining cell viability.
Viral Toxicity
A simple, quantifiable method for determining viral-induced cytopathic effects (CPE) in host cells caused by lytic virions:
Host Cell Metabolism
Lactate assays can be used to detect changes in glycolysis as a result of viral infection.
Detecção e Monitoramento da Carga Viral
Métodos baseados em PCR, como PCR em tempo real ou RT-PCR, são ferramentas fundamentais utilizadas no desenvolvimento de testes de detecção viral, e para a análise de genomas virais.
Os sistemas GoTaq® PCR e qPCR e a GoScript™ Reverse Transcriptase oferecem amplificação e transcrição reversa robustas e reprodutíveis para detectar e amplificar sequências de inúmeros alvos virais.
O GoTaq® 1-Step RT-qPCR System é aprovado para uso com o protocolo de detecção de SARS-CoV-2 do CDC. O PCR Master Mix também foi utilizado no desenvolvimento de um teste diagnóstico para SARS-CoV-2 por PCR.
Products for Monitoring Viral Replication
Ready-to-Use Master Mixes
Ready-to-use mix of optimized components for robust qPCR and RT-qPCR using hydrolysis probes.
PCR Optimization
Preformulated PCR master mix components to determine optimal PCR amplification conditions.
Reverse Transcription
Reliable cDNA synthesis for sensitive detection of expression. Available as a standalone enzyme, a complete kit or as a master mix with oligo(dT) or random primers.
Produção de RNA para Pesquisa e Desenvolvimento de Vacinas
RNA transcrito é necessário para a produção de vacinas, padrões virais, e pesquisa viral básica. Para estudos in vivo e in vitro, o RiboMAX® RNA Production System gera uma grande quantidade de RNA ou mRNA de alta qualidade a partir de um DNA modelo sem a necessidade de células de mamíferos ou componentes celulares. Estas transcrições de RNA ou mRNA in vitro, que tipicamente codificam um antígeno específico para uma doença como a proteína de entrada (spike) de um coronavírus, podem ser usadas como material de inoculação para estudos de infecção viral. Se o mRNA transcrito for usado como um terapêutico, o mRNA que codifica a proteína desejada pode ser envelopado conforme necessário para ser entregue ao tecido de interesse.
RNA Production Products and Resources
RNA Production Product
RiboMAX™ in vitro transcription system produces 2–5mg/ml RNA in a 1ml reaction.
