Ensaios de Viabilidade Celular e Citotoxicidade
Oferecemos uma extensa linha de ensaios e reagentes para determinar a viabilidade celular e a citotoxicidade em culturas de células em monocamada, microtecidos 3D, células primárias, células-tronco, culturas bacterianas e células infectadas por vírus. Muitos ensaios de viabilidade celular e citotoxicidade da Promega podem ser combinados com ensaios de apoptose e outros ensaios para determinar o mecanismo de morte celular e comparar com sensibilidade os dados de poço para poço, placa para placa e dia a dia.
Os ensaios de viabilidade celular e citotoxicidade são baseados em produtos químicos de detecção colorimétrica, fluorométrica e bioluminescente. Os ensaios de células vivas e em tempo real monitoram repetidamente ao longo do tempo e geram vários pontos de dados a partir de um único poço de ensaio. Os ensaios de ponto final podem fornecer formatos de ensaio sensíveis e de alto rendimento para determinar a saúde das células
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Introdução aos ensaios de viabilidade celular e citotoxicidade
Os ensaios de viabilidade celular e citotoxicidade medem as alterações celulares ou metabólicas associadas a células viáveis ou não viáveis. Esses ensaios podem detectar alterações estruturais, como a perda de integridade da membrana após a morte da célula, ou atividades fisiológicas e bioquímicas indicativas de células vivas.
O padrão ouro e o ensaio de viabilidade celular mais sensível é o CellTiter-Glo® Luminescent Cell Viability Assay, que mede o ATP intracelular. Os ensaios de ATP lise rapidamente a célula, fornecem inibidores de ATPase e componentes de reação de luciferase. A produção de luz é proporcional ao número de células viáveis.
A Promega também oferece ensaios de viabilidade colorimétricos, de fluorescência e de bioluminescência baseados no potencial de redução de uma célula viável. Esses ensaios incluem opções de ensaios colorimétricos (CellTiter 96® AQueous One Solution), fluorescentes (CellTiter-Blue® Viability Assay) e bioluminescentes (RealTime-Glo® MT Cell Viability Assay). O Ensaio de Viabilidade Celular RealTime-Glo® MT é um ensaio não-lítico que monitora continuamente a viabilidade celular ao longo do tempo com base no potencial de redução da célula.
Os ensaios de citotoxicidade medem os parâmetros associados à perda de integridade da membrana após a morte da célula. Os ensaios de citotoxicidade podem detectar proteínas citosólicas que não deveriam ser liberadas pela célula, a menos que a célula tenha perdido a integridade da membrana e as proteínas tenham vazado para fora da célula. A liberação de lactato desidrogenase (LDH) é uma medida bem aceita de morte celular que pode ser detectada com o ensaio bioluminescente LDH-Glo®. O ensaio CytoTox-Fluor® utiliza um substrato de peptídeo fluorogênico para medir a atividade de "protease de célula morta" liberada de células que perderam a integridade da membrana. Como alternativa, os ensaios de citotoxicidade podem detectar a capacidade dos corantes impermeáveis às células de entrar nas células após a perda da atividade da membrana. O CellTox™ Green é um corante fluorescente de ligação ao DNA que se liga ao DNA após a morte celular e gera um sinal estável que pode ser medido em ensaios de citotoxicidade em tempo real.
