CellTiter 96® Non-Radioactive Cell Proliferation Assay (MTT)

O Ensaio de Proliferação Celular Não Radioativo CellTiter 96® é uma coleção de reagentes qualificados que fornece um método conveniente para determinar o número de células viáveis. O ensaio CellTiter 96® é uma modificação do método de ensaio MTT descrito por Mosmann e incorpora vários aprimoramentos ao método que resolvem problemas técnicos anteriores, incluindo: 1) precipitação de proteínas séricas causada pela adição de solvente orgânico; 2) interferência do vermelho de fenol; 3) solubilização incompleta dos cristais de formazan, resultando em menor sensibilidade; e 4) estabilidade do produto colorido.

O ensaio CellTiter 96® é realizado pela adição de uma solução de corante otimizada e pré-misturada a poços de cultura de uma placa de 96 poços, geralmente contendo várias concentrações de fator de crescimento ou substância de teste. Durante uma incubação de 4 horas, as células vivas convertem o componente de tetrazólio MTT da Dye Solution em um produto formazan. Se você usa atualmente um ensaio de incorporação de [3H]-timidina, a adição de Dye Solution pode ser substituída pelo pulso de timidina radioativa no momento do ensaio em que o pulso de [3H]-timidina é normalmente adicionado. A Solubilization/Stop Solution é então adicionada aos poços de cultura para solubilizar o produto formazan, e a absorbância a 570 nm é registrada usando um leitor de placas de 96 poços. Além disso, a comparação direta entre a incorporação de [3H]-timidina e a conversão de tetrazólio demonstrou menos de 5% de diferença entre os dois ensaios para a determinação do conteúdo do fator de crescimento de várias amostras.

Recursos e vantagens

Ganho de sensibilidade: Detecte apenas 1.000 células/poço com um leitor de placas de 96 poços. Maior sensibilidade do que o procedimento de ensaio com vermelho neutro.

Use com uma variedade de células: Ensaio de células de mamíferos, plantas e leveduras.

Não radioativo: Não requer coquetel de cintilação ou descarte de resíduos radioativos.

Economize tempo: Realize o ensaio em uma placa de 96 poços sem etapas de lavagem, sem colheita de células e sem contagem de cintilação.

Prático e adaptado às suas necessidades: Não requer pesagem ou mistura de compostos de corante e segue um protocolo de 4 horas ou de um dia para o outro.