Como Funciona o CellTiter-Glo 3D?
O ensaio de viabilidade celular CellTiter-Glo® 3D foi projetado para determinar a viabilidade celular em esferóides de microtecidos 3D. O reagente do ensaio penetra em grandes esferóides e tem maior capacidade lítica, permitindo a determinação mais precisa da viabilidade em comparação com outros métodos de ensaio.
Com base na mesma química confiável do ensaio CellTiter-Glo® clássico, esse novo reagente de ensaio 3D mede o ATP como indicador de viabilidade e gera uma leitura luminescente muito mais sensível do que os métodos colorimétricos ou baseados em fluorescência. O protocolo simples, de 30 minutos, e o reagente pronto para uso permitem resultados rápidos.
Saiba como o Ensaio de Viabilidade Celular CellTiter-Glo® 3D pode ser usado para avaliar a toxicidade de medicamentos em organoides.
Melhor Recuperação de ATP em Esferoides de Microtecidos 3D Maiores
| Diameter of Spheroid (μm) | Classic CellTiter-Glo® Assay (pmol/microtissue) | CellTiter-Glo® 3D Assay (pmol/microtissue) | Ratio |
|---|---|---|---|
| 188 | 16 ± 4 | 17 ± 4 | 1.10 |
| 386 | 79 ± 3 | 94 ± 11 | 1.19 |
| 459 | 103 ± 2 | 126 ± 11 | 1.22 |
| 565 | 127 ± 3 | 178 ± 17 | 1.40 |
Melhor Capacidade Lítica
Penetração aprimorada de microtecido 3D, dados de viabilidade mais precisosOs esferoides de câncer de cólon HCT116 foram gerados pela semeadura de células na plataforma de gota suspensa de 96 poços InSphero GravityPLUS™ e cultivados por 4 dias.
Painel A. Um volume equivalente de reagente foi adicionado a todas as amostras e, após 5 minutos de agitação, a luminescência foi registrada aos 30 minutos.
Painel B. Uma concentração 2X de CellTox™ Green Dye foi adicionada ao CellTiter-Glo® 3D Reagent (à esquerda) ou ao ATPlite™ 1Step Reagent (à direita) antes da adição da amostra como um indicador de lise celular e as imagens foram adquiridas em 30 minutos. Os esferóides no Painel B têm cerca de 300μm de diâmetro, e as barras em cada imagem representam uma distância de 200μm.
Mais Sensível que os Ensaios de Viabilidade Celular Colorimétricos ou Fluorométricos
Os sinais luminescentes do Ensaio CellTiter-Glo® 3D são ordens de magnitude acima do fundo. Outros ensaios de viabilidade não-lítica que medem alterações na fluorescência (por exemplo, alamarBlue®) ou na absorbância (por exemplo, MTT) geram sinais que são apenas modestamente superiores aos sinais de controle sem células.
InSphero Insight™ human liver microtissues (~250μm). All microtissues were assayed using the CellTiter-Glo® 3D, alamarBlue® and MTT assays according to manufacturer's protocols. Total assay times for the CellTiter-Glo® 3D, alamarBlue® and MTT assays were 30 minutes, 3 hours and 8 hours, respectively.
HCT116 colon cancer cells seeded into an InSphero GravityPLUS™ 96-well hanging-drop platform and grown to generate ~340μm spheroids.
Compatível com uma Variedade de Métodos de Cultura 3D
Os resultados da triagem de compostos usando o ensaio CellTiter-Glo® 3D em culturas 3D de gota suspensa, placa de fixação ultrabaixa (ULA) e Matrigel® são mostrados abaixo. Foram obtidos resultados equivalentes para todos os três métodos.
HCT116 colon cancer cells were seeded as follows: 400 cells in hanging-drop; 1,000 cells in ULA or Matrigel®. Microtissues were grown for 4 days, treated with compounds for 48 hours, and then assayed with the CellTiter-Glo® 3D Reagent. Luminescence was recorded at 30 minutes.
O Ensaio CellTiter-Glo® 3D Demonstra Excelente Precisão
Experimento do fator Z'com microtecidos 3D
Quatrocentas células de câncer de cólon HCT116 foram semeadas em cada um dos 60 poços de uma placa de gota suspensa InSphero GravityPLUS™ de 96 poços e incubadas por 4 dias para formar 60 esferoides (~350μm de diâmetro). Metade dos esferoides foi tratada com panobinostat 100μM (quadrados pretos) e a outra metade foi tratada com veículo (DMSO 1%, quadrados laranja). Após 48 horas, todas as amostras foram testadas com o CellTiter-Glo® 3D Reagent. O ensaio CellTiter-Glo® 3D forneceu um fator Z de 0,81.
Tools to Monitor Biology in 3D Culture
When working with 3D culture models, choosing the right assay system is crucial. Learn about tools to monitor biology in 3D culture.
Bioluminescence Resource Center
Learn more about how luminescence works, what makes it different from fluorescence and how you can use luminescence to fuel your own research.
Protocols
Complete Protocol
Protocolos rápidos
Specifications
Catalog Number:
What's in the box?
| Item | Código | Tamanho |
|---|---|---|
CellTiter-Glo® 3D Reagent |
G968A | 1 × 10ml |
SDS
Search for SDSCertificado de Análise
Restrições de uso
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.Condições de armazenamento
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| Item | Código | Tamanho |
|---|---|---|
CellTiter-Glo® 3D Reagent |
G968A | 10 × 10ml |
SDS
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Restrições de uso
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.Condições de armazenamento
What's in the box?
| Item | Código | Tamanho |
|---|---|---|
CellTiter-Glo® 3D Reagent |
G968B | 1 × 100ml |
SDS
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Restrições de uso
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.Condições de armazenamento
Resources
Artigos
- Reproducible Drug Screening Assays Using Single Organoids
- Verifying Cell-Based Assays for Use with 3D Models
- Luminescent Viability Assays for Magnetically Bioprinted Hepatocyte Spheroids
- App Note: Predicting gastrointestinal toxicity
- Enhanced extrinsic apoptosis of therapy-induced senescent cancer cells using a death receptor 5 (DR5) selective agonist
- Lipidomics profiling reveals differential alterations after FAS inhibition in 3D colon cancer cell culture models
- ALDOC- and ENO2- driven glucose metabolism sustains 3D tumor spheroids growth regardless of nutrient environmental conditions: A multi-omics analysis
- High-pressure oxygen rewires glucose metabolism of patient-derived glioblastoma cells and fuels inflammasome response
- Delivery of a BET protein degrader via a CEACAM6-targeted antibody–drug conjugate inhibits tumour growth in pancreatic cancer models
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