O formato homogêneo "adicionar-misturar-medir" resulta em lise celular e geração de um sinal luminescente proporcional à quantidade de ATP presente. A quantidade de ATP é diretamente proporcional ao número de células presentes na cultura. O CellTiter-Glo® One Solution Assay gera um sinal luminescente estável do tipo "glow" com meia-vida superior a três horas. Essa meia-vida prolongada elimina a necessidade de injetores de reagentes e oferece flexibilidade para o processamento contínuo ou em lote de várias placas.
Não é necessária nenhuma preparação de reagente; basta descongelar e "adicionar-misturar-medir". Esse formato reduz o número de etapas de manuseio de placas. Os dados podem ser registrados 10 minutos após a adição do reagente, e o ensaio mede as células em números abaixo dos limites de detecção dos ensaios colorimétricos e fluorométricos padrão.
Os volumes são convenientes para aplicações HTS, e o ensaio pode ser usado com vários formatos de múltiplos poços, incluindo placas de 96 poços, regulares ou de baixo volume de 384 e 1536 poços. Os dados podem ser registrados por luminômetro ou dispositivo de imagem de câmera CCD.
O ensaio CellTiter-Glo fornece um sinal estável e luminescente com meia-vida superior a 3 horas, dependendo do tipo de célula e do meio de cultura utilizado, e pode ser usado com outros produtos químicos de ensaio não-líticos compatíveis da Promega.
Observações
O Cat.# G8461 é suficiente para 1.000 ensaios a 100µl/ensaio em placas de 96 poços ou 4.000 ensaios a 25µl/ensaio em placas de 384 poços. A Cat. nº G8462 é suficiente para 5.000 ensaios a 100 µl/ensaio em placas de 96 poços ou 20.000 ensaios a 25 µl/ensaio em placas de 384 poços.
Cell number correlates with luminescent output.
A direct relationship exists between luminescence measured with the CellTiter-Glo® One Solution Assay and the number of cells in culture over three orders of magnitude. Serial twofold dilutions of Jurkat cells were made in RPMI 1640 with 10% FBS and plated in three formats using automated dispensing equipment. Volumes plated were 100µl of cells per well in a 96-well plate (Panel A), 10µl of cells per well in low-volume 384-well plate (Panel B) and 4µl of cells per well in a 1536-well plate (Panel C). An equivalent volume of CellTiter-Glo® One Solution was dispensed into each well. Luminescence was recorded 10 minutes after addition of CellTiter-Glo® One Solution. There is a linear relationship (r2 > 0.99) between luminescent signal and cell number in each plate format.
Protocols
Specifications
Catalog Number:
SDS
Search for SDSCertificado de Análise
Restrições de uso
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.Condições de armazenamento
The CellTiter-Glo® One Solution Assay can also be stored at 4°C for 48 hours or at 22°C for 10 hours with ~10–12% loss of activity and can withstand two additional freeze-thaw cycles after the first thaw, with approximately 10% loss of activity with each additional freeze-thaw cycle.
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