GDP-Glo™ Glycosyltransferase Assay
Universal Glycosyltransferase Activity Assay
- Easy, "add-incubate-read" protocol
- Detects any glycosyltransferase that uses GDP-sugar as a substrate
- Ideal for low-activity glycosyltransferases
Catalog Number:
Size
Add a GDP-sugar substrate
Catalog Number: VA1090
Catalog Number: VA1091
Catalog Number: VA1092
Catalog Number: VA1093
Catalog Number: VA1094
Catalog Number: VA1095
Catalog Number: VA1096
Um Ensaio Simples e Bioluminescente para Atividade de Glicosiltransferase
O ensaio GDP-Glo™ Glycosyltransferase é um método homogêneo de adição de reagente único para detectar rapidamente a formação de GDP em reações de glicosiltransferase. Após a reação de glicosiltransferase, um volume igual de reagente de detecção de GDP é adicionado para converter simultaneamente o produto GDP em ATP e gerar luz em uma reação de luciferase. A luz gerada é detectada por meio de um luminômetro, e a saída de luz é proporcional à concentração de GDP de baixo nM a 25μM. A luminescência pode ser correlacionada à concentração de GDP usando uma curva padrão de GDP.
Adicionar-Misturar-Ler para Obter Resultados
Comece com enzimas purificadas, doadores de açúcar e moléculas aceitadoras, e você poderá detectar o produto da reação de glicosiltransferase GDP. Basta adicionar o reagente de detecção de GDP e medir a luminescência.
Funciona com a Maioria das Glicosiltransferases
O Ensaio GDP-Glo™ pode ser usado para medir a atividade de praticamente qualquer glicosiltransferase que use GDP-açúcar como substrato. Aqui, analisamos as fucosiltransferases envolvidas na exibição de antígenos em células imunológicas.
Detecta Quantidades Nanomolares Baixas de GDP; Ideal para Glicosiltransferases de Baixa Atividade
A sensibilidade do ensaio GDP-Glo™ Glycosyltransferase significa que ele pode detectar baixas concentrações de GDP com alta faixa dinâmica. Portanto, seja no ensaio de uma glicosiltransferase de baixa atividade cuja taxa de transferência de açúcar é baixa ou usando uma baixa concentração de enzima que produz uma pequena quantidade de GDP, é possível obter uma alta relação sinal-fundo usando o ensaio.
Os dados abaixo mostram a linearidade e a sensibilidade do ensaio GDP-Glo™ Glycosyltransferase. Aqui, uma curva padrão de GDP foi preparada na faixa de concentração indicada em 25 µl de tampão de reação de glicosiltransferase 1X em uma placa branca sólida de 96 poços. O ensaio GDP-Glo™ Glycosyltransferase foi realizado com 25 µl de reagente de detecção de GDP em temperatura ambiente. A luminescência foi registrada usando um luminômetro GloMax®. Os valores representam a média de quatro réplicas. A tabela mostra a luminescência medida 1 hora após a adição do Reagente de Detecção de GDP e a relação sinal-fundo calculada para cada concentração da curva padrão.
O Sinal Luminescente é Estável por Várias Horas
O ensaio GDP-Glo™ gera um sinal luminescente altamente estável por mais de 3 horas, o que o torna conveniente para o processamento em lote de várias placas de ensaio.
Os dados aqui apresentados mostram que o sinal obtido com o Ensaio GDP-Glo™ é estável por várias horas. Para determinar a estabilidade do sinal, a luminescência foi registrada 1 e 3 horas após a adição do reagente de detecção. A relação sinal/plano de fundo não se alterou durante o tempo medido (dados não mostrados). RLU = unidades de luz relativas.
Protocols
Specifications
Catalog Number:
What's in the box?
| Item | Código | Tamanho |
|---|---|---|
ATP Detection Substrate |
V363C | 1 × 1 vial |
Nucleotide Detection Buffer |
V696A | 1 × 5ml |
Enzyme Dilution Buffer |
V773A | 1 × 1.5ml |
GDP, 10mM |
VA111A | 1 × 100μl |
GDP-Glo™ Enzyme |
VA112A | 1 × 20μl |
SDS
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What's in the box?
| Item | Código | Tamanho |
|---|---|---|
|
ATP Detection Substrate |
V363A | 1 × 1 vial |
Nucleotide Detection Buffer |
V696B | 1 × 10ml |
Enzyme Dilution Buffer |
V773A | 2 × 1.5ml |
GDP, 10mM |
VA111A | 1 × 100μl |
GDP-Glo™ Enzyme |
VA112B | 1 × 40μl |
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| Item | Código | Tamanho |
|---|---|---|
|
ATP Detection Substrate |
V363B | 1 × 1 vial |
Nucleotide Detection Buffer |
V696C | 1 × 100ml |
Enzyme Dilution Buffer |
V773B | 1 × 15ml |
GDP, 10mM |
VA111A | 1 × 100μl |
GDP-Glo™ Enzyme |
VA112C | 1 × 200μl |
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| Item | Código | Tamanho | Concentration | Available Separately |
|---|---|---|---|---|
ATP Detection Substrate |
V363C | 1 × 1 vial | ||
Nucleotide Detection Buffer |
V696A | 1 × 5ml | ||
Enzyme Dilution Buffer |
V773A | 1 × 1.5ml | ||
GDP, 10mM |
VA111A | 1 × 100μl | ||
GDP-Glo™ Enzyme |
VA112A | 1 × 20μl | ||
GDP-Fucose |
VA109A | 1 × 50μl | 50mM | View Product |
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| Item | Código | Tamanho | Concentration | Available Separately |
|---|---|---|---|---|
|
ATP Detection Substrate |
V363A | 1 × 1 vial | ||
Nucleotide Detection Buffer |
V696B | 1 × 10ml | ||
Enzyme Dilution Buffer |
V773A | 2 × 1.5ml | ||
GDP, 10mM |
VA111A | 1 × 100μl | ||
GDP-Glo™ Enzyme |
VA112B | 1 × 40μl | ||
GDP-Fucose |
VA109A | 1 × 50μl | 50mM | View Product |
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| Item | Código | Tamanho | Concentration | Available Separately |
|---|---|---|---|---|
ATP Detection Substrate |
V363C | 1 × 1 vial | ||
Nucleotide Detection Buffer |
V696A | 1 × 5ml | ||
Enzyme Dilution Buffer |
V773A | 1 × 1.5ml | ||
GDP, 10mM |
VA111A | 1 × 100μl | ||
GDP-Glo™ Enzyme |
VA112A | 1 × 20μl | ||
GDP-Mannose |
VA110A | 1 × 50μl | 100mM | View Product |
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| Item | Código | Tamanho | Concentration | Available Separately |
|---|---|---|---|---|
|
ATP Detection Substrate |
V363A | 1 × 1 vial | ||
Nucleotide Detection Buffer |
V696B | 1 × 10ml | ||
Enzyme Dilution Buffer |
V773A | 2 × 1.5ml | ||
GDP, 10mM |
VA111A | 1 × 100μl | ||
GDP-Glo™ Enzyme |
VA112B | 1 × 40μl | ||
GDP-Mannose |
VA110A | 1 × 50μl | 100mM | View Product |
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