O ensaio cAMP-Glo™ Max é um ensaio homogêneo, bioluminescente e de alto rendimento para medir os níveis de AMP cíclico (cAMP) nas células. Os compostos que modulam os GPCRs acoplados à adenilato ciclase geralmente alteram os níveis de AMPc intracelular. O ensaio monitora os níveis de AMPc nas células em resposta ao efeito de agonistas, antagonistas ou compostos de teste nos receptores acoplados à proteína G (GPCRs) e baseia-se no princípio de que o AMP cíclico (AMPc) estimula a atividade da holoenzima da proteína quinase A (PKA), diminuindo o ATP disponível e levando à diminuição da produção de luz em uma reação de luciferase acoplada.
Improved Format for Better Performance
Essa versão aprimorada do ensaio cAMP-Glo™ combina os buffers de reação de lise e cAMP no cAMP-Glo™ ONE Buffer, simplificando o protocolo e acelerando o ensaio. O ONE Buffer é fornecido na concentração de 5X, o que proporciona maior flexibilidade para volumes iniciais de cultura de células.
O ensaio cAMP-Glo™ Max permite a quantificação fácil dos níveis de cAMP em uma ampla variedade de tipos de células e pode ser realizado em placas de 96, 384 ou 1536 poços. As células são induzidas com um composto de teste por um período de tempo adequado para modular os níveis de AMPc. Após a indução, as células são lisadas e o AMPc liberado estimula a proteína quinase A no reagente. O reagente Kinase-Glo® é então adicionado para encerrar a reação da PKA e detectar o ATP restante por meio de uma reação de luciferase. A leitura das placas é feita com um luminômetro de leitura de microplacas. A meia-vida do sinal luminescente é superior a 4 horas, proporcionando tempo suficiente para a leitura das placas e eliminando a necessidade de luminômetros com injetores de reagentes.
A Cat. # V1681 contém reagentes suficientes para 2 placas (formato de 96 ou 384 poços).
A Cat. # V1682 contém reagentes suficientes para 20 placas (formato de 96 ou 384 poços).
A Cat. # V1683 contém reagentes suficientes para 200 placas (formato de 96 ou 384 poços).