Lactate-Glo™ Assay

Part Numbers: J5021, J5022

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Quick, Sensitive Lactate Assay for a Variety of Biological Samples

  • Perform in high-throughput workflows
  • Multiplex with other metabolite or viability assays
  • Linear lactate detection range up to 200µM

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Código selecionado: J5021

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Lactate-Glo™ Assay

Detecção Rápida e Sensível de Lactato em uma Variedade de Amostras

O ensaio Lactate-Glo™ é um ensaio bioluminescente para detecção rápida, seletiva e sensível de L-lactato em amostras biológicas. O lactato é produzido pela glicólise, uma importante via metabólica responsável pela homeostase da glicose e pela produção de energia. Antes considerado apenas um subproduto da glicólise, o lactato agora é considerado uma importante molécula reguladora do metabolismo intermediário envolvido no desenvolvimento do câncer, no diabetes e em outras doenças. Isso significa que a detecção de lactato pode ser usada para medir alterações na glicólise.

Como Funciona o Ensaio de Lactato

O ensaio Lactate-Glo™ associa a oxidação do lactato e a produção de NADH com um sistema de detecção bioluminescente de NADH. A lactato desidrogenase usa lactato e NAD+ para produzir piruvato e NADH. Na presença de NADH, um substrato de pró-luciferina redutase é convertido pela redutase em luciferina, que é então usada em uma reação de luciferase para produzir luz. O ensaio Lactate-Glo™ contém uma lactato desidrogenase seletiva para L-lactato para conferir especificidade para L-lactato, o principal estereoisômero encontrado em células de mamíferos.

Quando o reagente de detecção de lactato, que contém lactato desidrogenase (LDH), NAD+, redutase, substrato de redutase e luciferase, é adicionado a uma amostra contendo lactato na proporção de 1:1, as reações acopladas à enzima são iniciadas e executadas simultaneamente. O sinal luminescente é proporcional à quantidade de lactato na amostra e aumenta até que todo o lactato seja consumido, momento em que se obtém um sinal luminescente estável.

Atende aos Seus Requisitos de Produtividade e Fluxo de Trabalho

O ensaio Lactate-Glo™ é um kit de detecção versátil que pode ser usado em formatos de alto rendimento e é compatível com muitos tipos de amostras. Para simplificar o processamento da amostra, o ensaio de detecção de lactato usa métodos de processamento que não exigem centrifugação da amostra ou colunas de centrifugação. Basta diluir suas amostras, adicionar soluções de inativação e neutralização, se necessário, e ensaiar todas as amostras diretamente em placas de 96 ou 384 poços.

 

Luminescent Signal is Proportional to Lactate Present in Sample

13887ma-w: Luminescence from lactate assay proportional to metabolite.
Lactate titration curve. Serial dilutions of lactate were prepared as described in TM493, and lactate detected using the Lactate-Glo™ Assay.

Lactate Secretion by A549 Cells

13888ma-w: Luminescent lactate assay measured secretion for 72 hours.
A549 cells were plated at 5,000 (light blue bars) and 15,000 (dark blue bars) cells/well as described in TM493. Red line represents the luminescence of medium-only controls. Samples were taken from the medium at times indicated and the amount of lactate measured using the Lactate-Glo™ Assay. 

Vantagens do Ensaio Lactate-Glo™

Detecte Rapidamente o Lactato em uma Variedade de Tipos de Amostras: Meça em meio, células, tecidos e plasma. O ensaio de detecção de lactose requer etapas mínimas de preparação, sem necessidade de centrifugação e colunas de centrifugação.

Realize um processamento fácil no poço para detecção intracelular.

Detectar Pequenas Mudanças nos Níveis de Lactato em uma Ampla Faixa de Concentrações: O ensaio sensível de lactato com ampla linearidade discrimina melhor as pequenas alterações no lactato em comparação com os ensaios colorimétricos e fluorométricos de lactato.

Obter Mais Informações por Amostra: O ensaio de detecção de lactose, juntamente com os outros ensaios de detecção de metabólitos bioluminescentes, é adequado para medir vários metabólitos da mesma amostra. Faça multiplex com ensaios de viabilidade celular para normalização.

Requer Apenas um Luminômetro: O mesmo leitor de placas que mede a viabilidade celular pode ser usado para monitorar a glicólise. Não são necessários instrumentos especializados, placas ou meio artificial.

Medição de Vários Metabólitos em uma Amostra

Meça facilmente as alterações na glicólise celular e na glutaminólise coletando amostras do meio ao longo do tempo. A medição direta de quatro metabólitos importantes para o estado energético da célula - glicose, lactato, glutamato e glutamina - pode ser realizada em paralelo usando os ensaios bioluminescentes Glucose-Glo™, Lactato-Glo™, Glutamina/Glutamato-Glo™ e Glutamato-Glo™. Não é necessário nenhum instrumento especializado, placas ou meio artificial. O processamento de amostras compatível com todos os ensaios de metabólitos bioluminescentes significa que a mesma amostra pode ser usada para detectar todos os quatro metabólitos. Isso inclui tipos de amostras como meio de cultura, soro, plasma e tecido. Os dados abaixo foram produzidos pela medição de metabólitos usando amostras de meio das mesmas culturas de células, conforme descrito no Manual Técnico TM494.

13836ma-w-a: Glucose consumption measured in metabolite multiplex assay.
13836ma-w-b: Lactate secretion measured in metabolite multiplex assay.
13836ma-w-c: Glutamine consumption measured in metabolite multiplex assay.
13836ma-w-d: Glutamate secretion measured in metabolite multiplex assay.

FAQs

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Especificações

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Item Código Tamanho Concentration

Reductase

G884A 1 × 55μl 6mg/ml

Reductase Substrate

G885A 1 × 55μl

Luciferin Detection Solution

J135A 1 × 5ml

NAD

J136A 1 × 30μl

Lactate

J137A 1 × 50μl

Lactate Dehydrogenase

J195A 1 × 1 each

Certificado de Análise

Search by lot number

Restrições de uso

For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.

Condições de armazenamento

AA

Patents and Disclaimers

U.S. Pat. Nos. 9,273,343 and 9,951,372, European Pat. No. 2751089, Japanese Pat. No. 6067019 and other patents pending.

Especificações

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Item Código Tamanho Concentration

Reductase

G884B 1 × 275μl 6mg/ml

Reductase Substrate

G885B 1 × 275μl

Luciferin Detection Solution

J135B 1 × 50ml

NAD

J136B 1 × 275μl

Lactate

J137A 1 × 50μl

Lactate Dehydrogenase

J195A 1 × 1 each

Certificado de Análise

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Restrições de uso

For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.

Condições de armazenamento

AA

Patents and Disclaimers

U.S. Pat. Nos. 9,273,343 and 9,951,372, European Pat. No. 2751089, Japanese Pat. No. 6067019 and other patents pending.

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