Kits e Reagentes de Investigação Epigenética
A Promega oferece kits e reagentes para a análise da metilação do ADN, modificação de histonas e transcrição de ARN para apoiar a sua investigação epigenética.
Para a avaliação da metilação, dispomos de ensaios de atividade de metilação, kits de purificação de ADN, enzimas de PCR e misturas principais, enzimas de restrição sensíveis à metilação e ferramentas básicas para transfecção. Oferecemos ensaios de repórteres de luciferase que pode utilizar para a deteção de HDAC, SIRT, metiltransferase e várias actividades de protease. Encontrará também kits de purificação e interação de proteínas epigenéticas para analisar marcas de histonas e identificar parceiros de ligação de proteínas de forma rápida e eficiente.
Grupos de Produtos de Investigação Epigenética
Cell-Based and Biochemical Assays
Luminescent assays for detecting HDAC, SIRT, methyltransferase and various protease activities, and protein interaction assays relevant in epigenetic studies.
Methylation Analysis
Methylase activity assays, DNA purification kits, PCR reagents, methylation sensitive restriction enzymes, and basic tools for transfection and reporter assays.
Protein Analysis and Complex Purification
Protein purification and interaction kits to analyze histone marks and identify protein binding partners rapidly and efficiently.
Principais produtos de investigação epigenética para o seu laboratório
NanoBRET® Target Engagement HDAC Assays
Directly measure HDAC-test compound affinity and residence time in live cells.
N2080, N2081, N2170, N2090
MTase-Glo™ Methyltransferase Assay
Measure methyltransferase activity using a universal bioluminescent assay.
V7601, V7602
HaloTag® Protein Purification System
Enhanced expression and solubility of recombinant proteins with HaloTag® Ligands.
G6280, G6270
Fundamentos da Investigação Epigenética
A epigenética é o estudo das alterações hereditárias na expressão dos genes que resultam de alterações nos cromossomas sem alteração da sequência do DNA. A coordenação entre a metilação do DNA e as marcas de silenciamento das histonas conduz à compactação da cromatina e à repressão dos genes.
O estado de metilação de uma sequência de DNA pode ser determinado utilizando uma variedade de técnicas, tais como enzimas de restrição que são sensíveis à metilação. A sequenciação com bissulfito é outra forma de avaliar a metilação do ADN. Após a conversão do bissulfito e a limpeza do DNA, o DNA é amplificado por PCR do genoma completo e os produtos amplificados são analisados utilizando um de vários métodos. A proteína repórter da luciferase do pirilampo (Fluc) também pode ser utilizada para avaliar a metilação do DNA.
A maioria da regulação mediada por histonas resulta da modificação de histonas, incluindo acetilação, metilação, fosforilação, ubiquitinação e sumoilação. A imunoprecipitação da cromatina (ChIP) é um ensaio poderoso para identificar as proteínas que lêem, escrevem ou apagam estas marcas. Um dos desafios do método ChIP é a disponibilidade de anticorpos específicos. Para ultrapassar a necessidade de anticorpos adequados, a Promega desenvolveu o Sistema HaloCHIP™.
Para a análise de potenciais inibidores da histona desacetilase (HDAC), a Promega disponibiliza os ensaios HDAC-Glo™ I/II e SIRT-Glo™ para medir as actividades relativas das enzimas HDAC de classe I e II e das sirtuínas, respetivamente. A Promega também oferece uma série de sistemas de enzimas quinase para monitorizar a atividade ou identificar inibidores de diferentes quinases envolvidas na fosforilação de histonas.
