Imunoensaios
Os reagentes de imunoensaio e os sistemas de deteção baseados em anticorpos da Promega incluem os novos imunoensaios Lumit™, bem como uma gama de anticorpos primários e secundários e reagentes de deteção utilizados nas técnicas tradicionais ELISA ou Western blotting.
Os imunoensaios Lumit™ constituem uma alternativa simples e rápida aos métodos de imunoensaio convencionais, incluindo ELISA em sanduíche e Western blots. O método baseado na bioluminescência pode ser concluído em apenas 30 minutos. Fornecemos vários tipos de imunoensaio Lumit™ para utilização em investigação, incluindo kits específicos para detetar a fosforilação de proteínas, citocinas, metabolitos ou ligação de receptores Fc neonatais. Também estão disponíveis reagentes de deteção Lumit™ e kits de marcação para criar os seus próprios ensaios Lumit™.
Grupos de produtos de imunoensaio
Lumit® Immunoassays for Research
A simple, rapid and sensitive alternative to ELISAs and other conventional immunoassays.
Antibody Labeling
Kits for labeling antibodies with bioluminescent tags or fluorescent dyes.
Primary and Secondary Antibodies
Antibodies, substrates and accessory products for immunoblotting, immunocytochemistry and immunohistochemistry.
Principais produtos de imunoensaio para o seu laboratório
Lumit® Immunoassay Labeling Kit and Detection Reagents
Antibody labeling kit and detection reagents to help develop Lumit® Immunoassays.
VB2500, VB2010, VB2020, VB2030, VB4050, VB4060
Lumit® Immunoassay Cellular Systems
A no-wash bioluminescent immunoassay to measure levels of target analytes in cell lysates.
W1201, W1202, W1203, W1331, W1332, W1333, W1220
Lumit® SARS CoV-2 Spike RBD: hACE2 Immunoassay
A homogeneous bioluminescent assay that measures interaction between SARS-CoV-2 spike protein receptor binding domain (RBD) and human angiotensin-converting enzyme 2 (ACE2).
O que são imunoensaios?
Os imunoensaios são métodos de deteção convenientes e amplamente utilizados, baseados na capacidade dos anticorpos para se ligarem e detectarem antigénios específicos. As técnicas ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assays) e Western blot são exemplos típicos de imunoensaios habitualmente utilizados.
Os ELISA são realizados em placas de vários poços em diversos formatos. Num ELISA em sanduíche, um anticorpo é ligado à superfície da placa e utilizado para capturar um antigénio alvo de uma amostra como o plasma ou o soro. Após uma lavagem cuidadosa, é adicionado um segundo anticorpo, que se liga ao antigénio, criando um anticorpo-antigénio-anticorpo “sandwich”. Este segundo anticorpo pode ser marcado com um substrato enzimático que permita a deteção, ou pode ser detectado com um anticorpo secundário marcado específico da espécie (por exemplo, IgG anti-humana). Noutros formatos ELISA, o antigénio alvo pode ser ligado diretamente à placa e utilizado para detetar anticorpos presentes numa amostra. Estes anticorpos ligados são então detectados utilizando um anticorpo secundário marcado.
Num imunoensaio enzimático, a enzima ligada ao anticorpo de deteção gera um sinal de cor proporcional à quantidade de antigénio alvo presente na amostra original. Dependendo do formato do imunoensaio, o grau de cor pode ser detectado e medido utilizando um leitor de placas espetrofotométrico ou de fluorescência.
No Western blotting, as proteínas individuais presentes numa amostra são separadas num gel e transferidas para uma membrana de nitrocelulose, que é depois interrogada com anticorpos marcados dirigidos contra antigénios específicos. Após a lavagem, os anticorpos ligados são visualizados através do desenvolvimento do sinal (cor, fluorescência ou quimioluminescência) gerado pelo anticorpo primário marcado ou por um anticorpo secundário.
As técnicas ELISA e Western blot oferecem vantagens em termos de especificidade, sensibilidade e relativa facilidade de utilização. No entanto, a sua execução é morosa, envolvendo numerosas etapas de lavagem e incubação. O número de passos envolvidos pode também levar a uma variabilidade significativa de ensaio para ensaio.
Os imunoensaios Lumit™ diferem dos Western blots e ELISAs por fornecerem um método sem lavagem, baseado na bioluminescência, para a deteção de várias moléculas alvo num formato rápido e sensível. Os imunoensaios Lumit™ baseiam-se na tecnologia binária NanoLuc® (NanoBiT®). Nos imunoensaios Lumit™, os anticorpos ou antigénios são quimicamente marcados com as subunidades pequena e grande da NanoBiT® luciferase, conhecidas como SmBiT e LgBiT, respetivamente. Na presença da molécula alvo, as duas subunidades são colocadas em estreita proximidade, permitindo que a SmBiT e a LgBiT formem uma enzima ativa e gerem um sinal de luminescência brilhante, que é detectado utilizando um leitor de microplacas.
