Deteção de proteínas

Oferecemos uma vasta gama de ferramentas para a deteção e quantificação de proteínas, desde reagentes de deteção imunológica tradicionais a novos métodos que monitorizam a abundância de proteínas em células vivas.

Os produtos de marcação de proteínas incluem a Tecnologia de Marcação Intercambiável HaloTag®— , uma ferramenta versátil de análise de proteínas utilizada para obter imagens de células de mamíferos vivas ou fixas, purificar proteínas, investigar interacções de proteínas e muito mais. O sistema de marcação de proteínas HiBiT fornece um método poderoso para monitorizar e quantificar proteínas a níveis de expressão endógena com um simples sinal luminescente.

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Noções básicas de quantificação e deteção de proteínas

A deteção e quantificação de proteínas individuais é um dos aspectos fundamentais da proteómica. Os métodos de base imunológica, como os ensaios quantitativos de imunoabsorção enzimática (ELISA), Western blotting e dot blotting, são ensaios muito comuns e sensíveis para a deteção de proteínas e utilizam anticorpos que reagem especificamente com proteínas inteiras ou epítopos específicos (por exemplo, etiquetas de fusão) após a lise celular. As técnicas de deteção baseiam-se normalmente na quimioluminescência ou na fluorescência.

Para a deteção de proteínas em células vivas, a microscopia de imagem por fluorescência é atualmente utilizada por rotina. O método mais comum e convencional é a utilização de proteínas intrinsecamente fluorescentes (FPs) relacionadas em estrutura ou sequência com a proteína fluorescente verde (GFP). Em alternativa, foi desenvolvida uma série de enzimas de auto-marcação que podem ligar covalentemente um ligando fluorescente a um dos seus próprios resíduos de aminoácidos. Estas enzimas são semelhantes em tamanho às FPs. Se estes domínios enzimáticos forem fundidos numa proteína, o par pode ser marcado através da introdução de um ligando fluorescente permeável às células, que reage covalentemente com a etiqueta de fusão.