Imunoensaio Lumit™ HMGB1 Humano/Camundongo

Detecção Rápida e Sem Lavagem de HMGB1

O High-Mobility Group Box 1 (HMGB1) funciona como um padrão molecular associado a danos (DAMP) liberado pelas células em respostas inflamatórias. O HMGB1 é frequentemente medido como um importante biomarcador de morte celular imunogênica, uma forma especializada de morte celular que resulta em uma resposta imunológica. A HMGB1 também funciona como uma citocina pró-inflamatória. Os métodos atuais de detecção de HMGB1, como o ELISA, exigem etapas de lavagem tediosas e protocolos demorados. A tecnologia Lumit™ simplifica a quantificação de HMGB1 com um protocolo de adição de mistura e medição concluído em 90 minutos ou menos.

Como Funciona o Imunoensaio Lumit™ HMGB1

Os anticorpos primários para HMGB1, selecionados por sua detecção específica e sensível, são marcados com as subunidades LgBiT e SmBiT da NanoBiT® Luciferase. Na presença de HMGB1, as subunidades são reunidas para formar uma enzima luciferase ativa. A adição de substrato otimizado gera um sinal de luminescência brilhante proporcional aos níveis de HMGB1. O ensaio detecta HMGB1 humano e de camundongo.

Protocolo Simples de Uma Placa, Sem Etapas de Lavagem

Ampla Faixa Dinâmica de Detecção de HMGB1

Devido à homologia do HMGB1 humano e do camundongo, o kit pode ser usado para ambas as espécies com diferenças mínimas de desempenho.

Lumit™ HMGB1 Human Immunoassay standard curve.

Lumit™ HMGB1 Mouse Immunoassay standard curve.

Target	Human HMGB1	Mouse HMGB1
Limit of Detection (3SD above background)	1ng/ml	3ng/ml
Dynamic Range	4–1,000ng/ml	3–2,187ng/ml
Assay Time	90 minutes
Sample Type	Cell culture samples

SD=Standard Deviation

Medições Duplas de DAMP em uma Linha Celular Humana

Data showing ATP release and HMGB1 release after mitoxantrone treatment — In parallel assay plates, U937 cells were dosed with mitoxantrone and assayed for extracellular ATP release (left) kinetically over 24 hours using the RealTime-Glo™ Extracellular ATP Assay. Lumit® HMGB1 Immunoassay reagents were added directly to the second plate of treated cells after 24 hours of treatment. Mitoxantrone produces a dose- and time-dependent release of extracellular ATP (left) and a dose-dependent release of HMGB1 (right) with potency agreement between the two measurements of damage-associated molecular patterns.

Detectar Morte Celular Imunogênica Induzida por Drogas em Vários Modelos de Cultura Celular

Drug-induced immunogenic cell death detected with HMGB1 assay. — Human U2OS cells (left) and mouse EL4 cells (right) were treated with doxorubicin for 24 hours. After 24 hours, the Lumit® HMGB1 Immunoassay was performed directly on cell culture samples to measure HMGB1 released from treated cells.

Também Disponível: Medição Cinética de ATP Extracelular em Células Vivas

O Ensaio RealTime-Glo™ Extracellular ATP mede cineticamente a liberação de ATP das células que estão morrendo para que você possa avaliar a indução da morte celular imunogênica em tempo real. Use esse ensaio para complementar o Imunoensaio Lumit™ HMGB1 para obter um quadro mais completo da morte celular imunogênica.

Protocolos

Complete Protocol

Lumit® HMGB1 (Human/Mouse) Immunoassay Technical ManualPDF (1943 KB) – English

What's in the box?

Item	Código	Tamanho
HMGB1 (Human) Positive Control	W140A	1 × 20μl
Anti-hHMGB1 mAb-SmBiT, 250X	W141A	1 × 50μl
Anti-hHMGB1 mAb-LgBiT, 250X	W142A	1 × 50μl
Lumit® Detection Substrate B	VB405A	1 × 160μl
Lumit® Detection Buffer B	VB406A	1 × 3.2ml

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For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.

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Patents and Disclaimers

U.S. Pat. No. 8,809,529, European Pat. No. 2635582, Japanese Pat. No. 5889910 and other patents and patents pending.

U.S. Pat. Nos. 9,797,889, 9,797,890, 10,107,800 and 11,493,504; European Pat. No. 2970412; Japanese Pat. Nos. 7280842 and 7532562; and other patents and patents pending.

What's in the box?

Item	Código	Tamanho
HMGB1 (Human) Positive Control	W140A	1 × 20μl
Anti-hHMGB1 mAb-SmBiT, 250X	W141A	5 × 50μl
Anti-hHMGB1 mAb-LgBiT, 250X	W142A	5 × 50μl
Lumit® Detection Substrate B	VB405A	5 × 160μl
Lumit® Detection Buffer B	VB406A	5 × 3.2ml

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