Ensaios de Luciferase
Os ensaios baseados em luciferase podem ser utilizados para investigar uma variedade de processos celulares utilizando a emissão de luz bioluminescente como uma medida sensível da atividade biológica. Oferecemos uma gama completa de produtos e ferramentas baseados em luciferase para as suas investigações.
As opções de repórteres incluem as luciferases NanoLuc®, Firefly e Renilla, que têm diferentes tamanhos de proteínas, estabilidades de repórteres e brilho. Detecte o repórter de luciferase utilizando reagentes líticos ou de células vivas que fornecem níveis variáveis de brilho e estabilidade de sinal. Os reagentes de deteção de repórteres duplos oferecem normalização ou multiplexagem de ensaios. Clone o seu promotor ou outros elementos genéticos num vetor otimizado ou utilize um vetor pré-concebido para investigar estresse celular e eventos de sinalização ou aplicações de imagiologia. Os reagentes de transfecção estão disponíveis para introduzir o seu construto-repórter nas células-alvo.
Grupos de Produtos baseados em Luciferase
Vetores de Reporter Genético e Linhas Celulares
Vetores de genes repórteres, incluindo os genes luciferase, GFP e beta-gal. Também linhas celulares que expressam de forma estável a luciferase do vagalume.
Ensaios de Repórteres
Ensaios bioluminescentes de última geração. Reagentes para detectar atividades de luciferase de vaga-lume, Renilla, NanoLuc e Click-beetle.
Reagentes de Transfecção
Soluções de transfecção comprovadas e bem citadas para uma variedade de tipos de células, incluindo células primárias e iPSCs.
Principais Produtos de ensaio de Luciferase para o seu Laboratório
Nano-Glo® Dual-Luciferase Reporter Assay System
Detecção ultrassensível das atividades da luciferase NanoLuc® e Firefly em uma única amostra.
N1610, N1620, N1630, N1650, N1521, N1531, N1541, N1551
ONE-Glo™ EX Luciferase Assay System
Ensaio ONE-Glo™ aprimorado, adequado para a maioria das aplicações de firefly. Sinal mais duradouro do que o ONE-Glo™ Assay original, com maior estabilidade para uso e armazenamento flexíveis.
E8110, E8120, E8130, E8150
FuGENE® HD Transfection Reagent
Desempenho otimizado numa ampla faixa de tipos de células, incluindo linhagens celulares de difícil transfecção
E2311, E2312
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O que são ensaios de Luciferase?
Compreender como um promotor ou elemento de resposta pode controlar a expressão genética é mais fácil quando estudado com um gene repórter. As enzimas luciferases são ideais para ensaios de repórteres com deteção simples baseada na luz e alta sensibilidade que pode quantificar até pequenas alterações na expressão. Embora os ensaios repórteres sejam frequentemente utilizados para avaliar alterações na atividade do promotor, também podem ser utilizados para investigar a transdução de sinais, a função das proteínas, a regulação do miRNA e até a medição em tempo real de processos em organismos vivos.
A base de um ensaio repórter é o vetor, que transporta o gene repórter, e os reagentes de deteção que fornecem um substrato para converter a atividade da enzima luciferase num sinal luminoso. Os reagentes de deteção de luciferase dupla extinguem o primeiro sinal do repórter antes de ler o segundo para permitir que dois repórteres sejam medidos sequencialmente a partir da mesma amostra. O segundo repórter é frequentemente incluído como controlo interno para obter dados mais precisos.
Uma vez selecionado o vetor repórter e clonados quaisquer elementos (se necessário), o vetor é introduzido em células de cultura, normalmente utilizando métodos baseados na transfecção, expresso e a atividade detectada com reagentes líticos (ponto final) ou reagentes de células vivas para medir as alterações nas mesmas células ao longo do tempo. Os ensaios de repórteres de luciferase podem ser combinados com outros ensaios para avaliar a apoptose, o metabolismo e outros. A medição dos ensaios de luciferase é normalmente efetuada utilizando um luminômetro de placas.
