Vectores

Esta coleção de vectores de plasmídeos inclui vectores básicos de clonagem e subclonagem, vectores repórteres bioluminescentes para monitorizar eventos de sinalização e atividade de miRNA, e vectores de expressão de proteínas para utilização em sistemas de expressão de proteínas sem células e com base em células.

Noções básicas sobre vectores

Os vectores de plasmídeos são utilizados como ferramentas moleculares para clonar e transferir fragmentos de ADN entre células. Os vectores disponíveis no mercado foram concebidos e optimizados para numerosas aplicações específicas de investigação.

Os vectores de clonagem básicos incluem locais de restrição convenientes para facilitar a inserção de sequências de ADN cortadas com enzimas de restrição específicas. Os vectores de clonagem também incluem frequentemente genes concebidos para facilitar a identificação de plasmídeos que contêm ADN inserido e estão disponíveis com uma variedade de opções de promotores e outros elementos que facilitam a propagação do vetor no hospedeiro bacteriano de interesse. Os vectores de clonagem também incluem genes de resistência a antibióticos para permitir a seleção de bactérias que contêm o vetor de interesse utilizando meios que contêm o antibiótico relevante.

Os vectores T são um tipo específico de vetor de clonagem que recebe o seu nome das saliências T adicionadas a um plasmídeo linearizado. Estes vectores tiram partido das saliências A nos produtos de PCR após amplificação com Taq DNA polimerase, fornecendo extremidades compatíveis para a ligação de fragmentos de ADN amplificados por PCR. 

A variedade de formas em que os plasmídeos podem ser manipulados para fins de investigação específicos é praticamente ilimitada. Muitos vectores da Promega são vectores repórteres que contêm várias combinações de genes de luciferase (pirilampo, Renilla, NanoLuc luciferase) com outros elementos genéticos. O sinal de luminescência destes vectores repórteres é utilizado como indicador da atividade de qualquer gene/elemento de ADN ligado ao repórter.

Os vectores de expressão de proteínas são ferramentas básicas para a produção de proteínas. Os vectores de expressão incluem elementos reguladores concebidos para a produção eficiente da proteína recombinante na célula hospedeira. Os vectores de expressão proteica podem também anexar marcadores (como His tag, HaloTag ou proteína verde fluorescente) à proteína clonada para permitir uma fácil purificação ou imagiologia da proteína de fusão.